重组人白血病抑制因子体外诱导HL-60细胞凋亡与bcl-2及p5表达的关系

中国临床药理学与治疗学 ›› 2004, Vol. 9 ›› Issue (6): 695-697.

重组人白血病抑制因子体外诱导HL-60细胞凋亡与bcl-2及p5表达的关系

杜冰, 朱道银¹, 唐恩洁

川北医学院分子生物学研究所, 组织胚胎学胚教研室, 南充637007, 四川;
¹重庆医科大学微生物学教研室, 重庆400016

收稿日期:2004-02-14 修回日期:2004-03-20 发布日期:2020-11-22
通讯作者: 唐恩洁,女, 教授, 硕士生导师, 主要从事分子生物学、免疫学和微生物学研究。Tel:0817-2242780
作者简介:杜冰, 硕士。E-mail:n13990884328 @163.com
基金资助:
四川省教育厅重点基金项目(No01LA65)

Relation between recombinant human leukemia inhibitory factor(rh-LIF) induced apoptosis of HL-60 cells in vitro and expression of bcl-2 and p53

DU Bing, ZHU Dao-Yin¹, TANG En-Jie

Institute of Molecular Biology, North Sichuan Medical College, Nanchong 637007, Sichuan, China;
¹Department of Microbiology, College of Basic Medicine, Chongqing Medical University, Chongqing 400016, China

Received:2004-02-14 Revised:2004-03-20 Published:2020-11-22

摘要/Abstract

摘要： 目的探讨重组人白血病抑制因子(rh-LIF) 诱导HL-60 细胞凋亡的作用及其可能机制。方法不同剂量(10 ~ 4 000 U·ml^-1) 的rh-LIF 作用HL-60 细胞3 d 后, 用流式细胞仪观察分析细胞周期变化并检测细胞凋亡率, 用TUNEL 法检测原位细胞凋亡情况;分别用免疫组化法和原位杂交法检测rh-LIF 作用2、4、6 d 后P53 蛋白及p53 mRNA、bcl-2 mRNA 表达水平的改变。结果 rh-LIF (10 ~ 4 000 U·ml^-1) 作用d 3, 细胞凋亡率较对照组显著增加, 其中以1 000 U·ml^-1组的作用最强;rh-LIF (800 U·ml^-1) 作用2 ~ 6 d,P53 蛋白和p53 mRNA 表达也同步增高,而bcl-2 mRNA 表达显著降低(P <0.01)。结论 rh-LIF 能诱导HL-60 细胞凋亡, 该作用与P53 蛋白表达增加和bcl-2 表达降低有关。

关键词: rh-LIF, 凋亡, HL-60 细胞, bcl-2, p53

Abstract: AIM: To investigate the effect of recombinant human leukemia inhibitory factor (rh-LIF) on human myeloid leukemia cell line HL-60. METHODS: HL-60 cells were treated with various concentrations of rh-LIF (10-4 000 U·ml^-1) for a few days, cell cycle and cell apoptosis rate were analysed by flow cytometry.Cell apoptosis was also observed under microscope with TUNEL.Expression of P53 protein after addition of rh-LIF (800 U ·ml^-1) was observed by immunohistochemistry, and p53 mRNA and bcl-2 mRNA were assayed by in situ hybridization. RESULTS: Cell apoptosis rates (CAR) in rh-LIF groups by flow cytometry were higher than those in control group, and 1 000 U·ml^-1 rh-LIF had the most potent effect on induction of apoptosis. There was also a marked increase of positive-cells by TUNEL method in a concentration-dependent pattern on the 3rd day after addition of rh-LIF (10-1 000 U · ml^-1).Following addition of rh-LIF (800 U·ml^-1) and incubation for 2 to 6 days, the expression of P53 protein and p53 mRNA of HL-60 cells increased obviously, and bcl-2mRNA expression decreased in a time-dependent pattern(vs control, P <0.01). CONCLUSION: rh-LIF can induce apoptosis, and the effects may be related to the increase of P53 protein and decrease of bcl-2 mRNA expression.

Key words: recombinant human leukemia inhibitory factor, apoptosis, HL-60 cell, bcl-2, p53

中图分类号:

R965.2

杜冰, 朱道银, 唐恩洁. 重组人白血病抑制因子体外诱导HL-60细胞凋亡与bcl-2及p5表达的关系[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2004, 9(6): 695-697.

DU Bing, ZHU Dao-Yin, TANG En-Jie. Relation between recombinant human leukemia inhibitory factor(rh-LIF) induced apoptosis of HL-60 cells in vitro and expression of bcl-2 and p53[J]. Chinese Journal of Clinical Pharmacology and Therapeutics, 2004, 9(6): 695-697.

参考文献

1 Bauer S, Rasika S, Han J, Mauduit C, Raccurt M, Morel G, et al.Leukemia inhibitory factor is a key signal for injury-induced neurogenesis in the adult mouse olfactory epithelium[J]. J Neurosci, 2003;23(5):1792-803
2 武泽.白血病抑制因子与胚胎发育和胚泡着床的关系[J].中国实用妇产科杂志, 2002;18(9):571-3
3 郭世绂.性激素和细胞因子与骨关节炎及骨质疏松的关系[J].国外医学·内分泌分册, 2003;23(2):98-100
4 刘厚奇, 傅继梁.白血病抑制因子受体与细胞内信号分子[J].国外医学·分子生物学分册, 1998;20(4):166-9
5 Schere-Levy C, Buggiano V, Quaglino A, Gattelli A, Cirio MC, Piazzon I, et al.Leukemia inhibitory factor induces apoptosis of the mammary epithelial cells and participates in mouse mammary gland involution[J].Exp Cell Res, 2003;282(1):35-47
6 董晖, 周雁, 赵寿元, 李昌本.mRNA 二级结构对重组人白血病抑制因子(rh-LIF) 在大肠杆菌中的表达的影响[J].复旦学报(自然科学版), 1999;(5):497-501
7 杜冰, 朱道银, 唐恩洁.重组人白血病抑制因子对HL-60细胞的作用及机制研究[J].重庆医科大学学报, 2003;28(3):270-2
8 蔡文琴.原位杂交组织化学[A].见:蔡文琴, 王伯云, 主编.实用免疫细胞化学与核酸分子杂交技术[M].成都:四川科学技术出版社, 1994:406-34
9 Brach MA, Riedel D, Mertelsmann RH, Herrmann F.Synergistic effect of recombinant human leukemia inhibitory factor (LIF) and 1-β-D arabinofuranosylcytosine (Ara-c) on proto-oncogene expression and induction of differentiation in human U937 cells[J].Leukemia, 1990;4(9):646-9
10 周剑锋, 陈燕, 李崇渔, 向建平, 喻东姣, 邹萍, 等.阿糖胞苷诱导HL-60 细胞凋亡的研究[J].中华肿瘤杂志, 1997;19(2):107-10
11 唐加明, 黄任魏, 林桂真, 夏忠军, 林东军, 李铭权.阿糖胞苷及VM26 体外诱导原代培养急性非淋巴细胞白血病细胞凋亡[J].白血病, 1999;8(6):330-2
12 许小平, 史剑慧, 费新红, 陈莉, 吕书晴, 许晓巍, 等.体外化疗药物诱导白血病细胞凋亡预测临床疗效[J].肿瘤学杂志, 2003;9(3):82-4
13 Lotem J, Sachs L.Control of apoptosis in hematopoiesis and leukemia by cytokines, tumor suppressor and oncogenes[J]. Leukemia, 1996;10(6):925-31
14 Sempowski GD, RheinME, Scearce RM, Haynes BF.Leukemia inhibitory factor is a mediator of Escherichia coli lipopolysaccharide-induced acute thymic atrophy[J].Eur J Immunol, 2002;32(11):3066-70

[1]	范杰, 金永明, 江孝龙, 蒋国华. lncRNA HOTAIR调控miR-206影响类风湿关节炎滑膜细胞增殖和凋亡的分子机制研究[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2023, 28(7): 736-742.
[2]	王鑫昱, 陈亦鹏, 马永力, 何君妃. “杜仲-当归”调控NLPR3炎症小体对骨关节炎大鼠改善作用的研究[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2023, 28(7): 751-757.
[3]	杨晓佳, 江萌, 吴敏, 张伊黎, 吕兰, 吴嫄芬, 王鑫昱, 刘立权. 藏红花素介导DKK3调控GSK-3β/β-catenin通路对阿尔兹海默症大鼠的认知改善作用[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2023, 28(5): 489-497.
[4]	侯小煜, 冷玉芳, 曹雪芬, 吕兴娇, 韩晓霞, Janvier NIBARUTA, 刘永强. 五味子乙素减轻小鼠肠缺血再灌注损伤的网络药理学分析及实验验证[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2023, 28(2): 147-154.
[5]	王剑, 孙永东, 周兴玮, 刘雷, 陈龙, 童兴科, 朱佳丽. 黄芩素经由miR-125b-5p/IRF4轴进而促进喉癌细胞死亡并抑制其侵袭的机制研究[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2023, 28(11): 1209-1218.
[6]	朱瑞芳, 郭东凯, 智慧, 江翊国, 张悦翎, 钱晓萍, 季士亮. ROS-NF-κB-p38MAPK通路探索榄香烯联合硼替佐米抗多发性骨髓瘤的机制研究[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2023, 28(11): 1219-1226.
[7]	周欢, 徐铭, 李波, 刘春英, 王淳. PI3K/Akt/FOXO3a信号通路介导的保护性自噬参与肺腺癌获得性顺铂耐药表型重塑[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2022, 27(9): 961-970.
[8]	华海燕, 严杰, 秦宇芬. 五味子乙素通过抑制心肌细胞凋亡减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的实验研究[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2022, 27(8): 848-856.
[9]	李雪恒, 李龙. 褪黑素与特发性肺纤维化关系的研究进展[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2022, 27(6): 715-720.
[10]	姚瑶, 夏敏, 侯聪, 何爱荣. ABT-737对TAMs与SKOV3细胞共培养中卵巢癌细胞生长与血管拟生作用的影响[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2022, 27(2): 144-153.
[11]	杨柳, 罗爱林, 李世勇. 全麻药物损伤发育期大脑的研究进展[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2022, 27(12): 1381-1390.
[12]	谭峰浪, 任宏丽, 王宏飞. 黄柏提取物对Aβ_1-42诱导的海马神经细胞的影响[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2022, 27(11): 1213-1220.
[13]	潘蓉蓉, 支英豪, 金永喜, 周夏慧. 茶黄素调节CaMKK2/AMPK信号通路对脑出血大鼠神经元凋亡和血脑屏障的影响[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2022, 27(11): 1240-1246.
[14]	李莹, 姚伟, 王萌, 余志宏, 龚园其, 蓝海兵, 齐协飞. 鸢尾素通过NF-κB和JNK信号通路减轻屋尘螨诱导的气道上皮细胞炎症及凋亡的实验研究[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2022, 27(10): 1106-1112.
[15]	刘云帆, 杜月梅, 刘晓艺, 高丽萍. 枸杞多糖对顺铂诱导小鼠睾丸支持细胞凋亡的影响[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2021, 26(6): 624-630.