中国临床药理学与治疗学 ›› 2022, Vol. 27 ›› Issue (1): 8-14.doi: 10.12092/j.issn.1009-2501.2022.01.002
郭宇婷1,2，李珊珊1，李庆林1
GUO Yuting1,2, LI Shanshan1, LI Qinglin1
摘要： 目的：研究天麻钩藤饮（TGY）对鱼藤酮（Rot）诱导的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞损伤的影响及可能的机制。方法：采用Rot建立和培养PC12细胞神经损伤模型并利用MTT比色法测定细胞存活率，确定Rot的最佳造模浓度以及TGY的有效干预浓度。流式细胞仪检测细胞的脂质活性氧（ROS）水平并用荧光倒置显微镜观察细胞荧光强度的变化；生化试剂盒检测超氧化物歧化酶（SOD），谷胱甘肽（GSH）的水平和活力变化以及丙二醛（MDA）含量的变化。透射电子显微镜观察细胞线粒体形态变化，蛋白免疫印迹法检测细胞内谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4），长链脂酰辅酶A合成酶4（ACSL4），溶血卵磷脂酰基转移酶3（LPCAT3）蛋白表达。结果：0.6 μmol/L Rot处理细胞24 h后，细胞存活率接近50%（56.7%±9.9%），TGY预处理12 h后可抑制Rot的损伤程度。同时，减少乳酸脱氢酶（LDH）的漏出率，并呈现一定的量效关系。Rot处理后的细胞内脂质ROS含量升高，而给予TGY预处理后有效降低Rot损伤的细胞内脂质ROS的含量，降低Rot处理后的MDA水平，并提高SOD活力和GSH水平。通过透射电镜观察到与正常组相比，0.6 μmol/L Rot处理后细胞的线粒体皱缩，TGY预保护处理后，PC12细胞的线粒体形态有一定程度的改善。Western blot的结果呈现出TGY预处理后可以在一定程度提高Rot损伤后GPX4的表达，下降ACSL4、LPCAT3的表达。 结论：TGY可以上调GPX4蛋白的表达，下调ACSL4、LPCAT3蛋白的表达，抑制不饱和脂肪酸的氧化，降低脂质过氧化水平和ROS的含量，从而改善神经损伤。
中图分类号:
