珠子参总皂苷对H2O2诱导新生大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用

中国临床药理学与治疗学 ›› 2012, Vol. 17 ›› Issue (8): 860-867.

珠子参总皂苷对H₂O₂诱导新生大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用

陈良金¹, 石孟琼¹, 贺海波², 熊兴军³, 卢训丛¹

¹三峡大学医学院,宜昌 443002,湖北;²三峡大学天然产物研究与利用湖北省重点实验室,宜昌 443002,湖北;³长阳县中医院,长阳 443006,湖北

收稿日期:2012-02-03 修回日期:2012-05-10 出版日期:2012-08-26 发布日期:2012-08-14
通讯作者: 石孟琼,女,实验师,研究方向:心脑血管药理。Tel: 13687220902 E-mail: shmq0212@126.com
作者简介:陈良金,男,副教授,研究方向:中医内科基础与临床。Tel: 15572761106 E-mail: cljcy@126.com

Protective effects of total saponin from Panacis majoris rhizoma against H₂O₂-induced apoptosis in neonatal rat cardiomyocytes

CHEN Liang-jin¹, SHI Meng-qiong¹, HE Hai-bo², XIONG Xing-jun³, LU Xun-cong¹

¹Medical Science College, China Three Gorges University, Yichang 443002, Hubei, China;
²Hubei Key Laboratory of Natural Products Research and Development, China Three Gorges University, Yichang 443002, Hubei, China;
³Department of Pharmacy, Traditional Chinese Medicine Clinical Hospital, Changyang 443500, Hubei, China

Received:2012-02-03 Revised:2012-05-10 Online:2012-08-26 Published:2012-08-14

摘要/Abstract

摘要： 目的: 观察珠子参总皂苷对H₂O₂诱导新生大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用,并探讨其作用机制。方法: Wistar乳鼠心肌细胞原代培养,用H₂O₂建立氧化应激损伤模型,然后用珠子参总皂苷(100, 200 μg/mL)孵育 24 h后,MTT法检测珠子参总皂苷对细胞活力的影响,流式细胞仪和Hoechst33258染色检测珠子参总皂苷对氧化应激诱导细胞凋亡及胞内ROS含量的影响,比色法测定心肌细胞Caspase-3、Caspase-9的活性,荧光定量PCR测定心肌细胞Bcl-2和Bax mRNA表达,并计算Bcl-2与Bax的比值。结果: 珠子参总皂苷(100, 200 μg/mL)能显著改善心肌细胞活性,有效保护线粒体膜电位的稳定,抑制心肌细胞凋亡和改善细胞形态,降低细胞内活性氧(ROS)含量;下调Bax mRNA表达,上调Bcl-2 mRNA表达及Bcl-2与Bax的比值;降低H₂O₂所致新生大鼠心肌细胞中Caspase-3、Caspase-9的活性。结论: 珠子参总皂苷对H₂O₂诱导心肌细胞凋亡有显著的抑制作用,其机制可能与其稳定心肌细胞膜、清除ROS及调节心肌细胞Bcl-2、Bax和Caspase-3、Caspase-9表达有关。

关键词: 珠子参总皂苷, H₂O₂, 心肌细胞, 凋亡, Bcl-2, Bax, Caspase-3, Caspase-9

Abstract: AIM: To observe the inhibition effects of total saponin from Panacis majoris rhizoma on myocardial apoptosis of neonatal rat induced by H₂O₂ and its mechanism.METHODS: Oxidative stress-induced injury model was established with H₂O₂. Effects of total saponin from Panacis majoris rhizome (100, 200 μg/mL) on viability of cells and oxidative stress-induced apoptosis of cells were detected by MTT assay; Cell apoptosis rate and reactive oxygen species(ROS)content were detected by flow cytometry, the apoptosis cells morphous were observed by hoechst33258 through fluorescence microscope; The levels of Caspase-3, 9 were measured by detecting kits; Real-time polymerase chain reaction was applied to detect the mRNA expressions of Bcl-2 and Bax apoptosis-related genes.RESULTS: Total saponin from Panacis majoris rhizome (100, 200 μg/mL) might significantly increase cell viability and mitochondrial membrane potential, inhibit myocardial apoptosis, improve cell morphous, decrease intra-cellular ROS contents, down-regulate mRNA expression of Bax, up-regulate the mRNA expression of Bcl-2 and Bcl-2/Bax ratio, decrease activities of Caspase-3, 9, and with the dose of total saponin increasing, the aforesaid improvement became more and more strong.CONCLUSION: Total saponin from Panacis majoris rhizome could effectively inhibit myocardial apoptosis of neonatal rat induced by H₂O₂. The mechanism may be related to stabilizing mitochondrial membrane potential, scavenging of ROS, regulating the Caspase-3, 9, Bcl-2 and Bax expression levels.

Key words: Total saponin from Panacis majoris rhizome, H₂O₂, Cardiomyocytes, apoptosis, Bcl-2, Bax, Caspase-3, Caspase-9

中图分类号:

R965.2

陈良金, 石孟琼, 贺海波, 熊兴军, 卢训丛. 珠子参总皂苷对H₂O₂诱导新生大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2012, 17(8): 860-867.

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珠子参总皂苷对H₂O₂诱导新生大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用

Protective effects of total saponin from Panacis majoris rhizoma against H₂O₂-induced apoptosis in neonatal rat cardiomyocytes

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