酸性条件下神经生长因子对大鼠关节软骨细胞酸敏感离子通道1a表达的影响

中国临床药理学与治疗学 ›› 2015, Vol. 20 ›› Issue (10): 1081-1086.

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酸性条件下神经生长因子对大鼠关节软骨细胞酸敏感离子通道1a表达的影响

唐杰¹，胡伟²，吴繁荣¹，葛金芳¹，潘春晓¹，高文凡¹，陈飞虎¹

¹安徽医科大学药学院，合肥 230032，安徽；²安徽医科大学第二附属医院药剂科，合肥 230601，安徽

收稿日期:2015-08-05 修回日期:2015-09-13 出版日期:2015-10-26 发布日期:2015-11-12

Received:2015-08-05 Revised:2015-09-13 Online:2015-10-26 Published:2015-11-12

摘要/Abstract

摘要： 目的: pH6.0培养条件下观察神经生长因子（NGF）对大鼠关节软骨细胞酸敏感离子通道1a（ASIC1a）基因和蛋白表达的调控作用及其机制。方法: 体外提取培养原代大鼠膝关节软骨细胞，酸性环境下观察细胞NGF高亲和力受体Trk-A的表达情况；不同浓度NGF刺激观察ASIC1a的表达变化；10 ng/mL NGF刺激不同时间胞外信号调节激酶（ERK1/2）及c-fos磷酸化的时效关系，阻断ERK1/2（PD98059 30 μmol/L）后观察c-fos磷酸化水平和ASIC1a的表达；RT-PCR检测ASIC1a基因的表达，Western Blot检测Trk-A、ASIC1a、ERK1/2、pc-fos蛋白的表达。结果: 在酸性环境下NGF的高亲和力受体Trk-A表达比正常环境可高出3倍，ASIC1a的表达随着NGF的浓度升高而升高，10 ng/mL 时趋于稳定；NGF刺激后，ERK1/2及c-fos活化增强，4 h 达到最大水平；阻断了ERK1/2之后，p-c-fos和ASIC1a蛋白表达下降，差异具有显著性(P<0.01)。结论: 在酸性环境下，NGF促进了大鼠关节软骨细胞ASIC1a表达的上调，并且ERK1/2信号通路的活化可能参与了这一过程。

关键词: 关节软骨细胞, 酸敏感离子通道, 神经生长因子, 酸性环境, 胞外信号调节激酶

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