氨曲南联用阿奇霉素对产膜铜绿假单胞菌作用的实验研究

中国临床药理学与治疗学 ›› 2017, Vol. 22 ›› Issue (12): 1400-1405.

氨曲南联用阿奇霉素对产膜铜绿假单胞菌作用的实验研究

李娜¹，刘桢宇¹，胡文²，陈春林¹

¹宜春学院化学与生物工程学院，宜春 336000，江西；²宜春市人民医院药剂科，宜春 336000，江西

收稿日期:2017-05-09 修回日期:2017-06-12 出版日期:2017-12-26 发布日期:2018-01-02
通讯作者: 陈春林，男，博士，讲师，研究方向：临床药学。 Tel：0795-3201098 E-mail:chenchunlinycxy@163.com
作者简介:李娜，女，硕士研究生，研究方向：临床药学。 Tel:15270151948 E-mail:linanayiyi@163.com
基金资助:
国家自然科学基金-地区科学基金项目（81560584）

Effects of Aztreonam combined Azithromycin on Pseudomonas aeruginosa bioflim

LI Na¹, LIU Zhenyu¹, HU Wen², CHEN Chunlin¹

¹College of Chemical and Biological Engineering, Yichun College, Yichun 336000, Jiangxi, China; ²Department of Pharmacy, Yichun Municipal People' s Hospital, Yichun 336000, Jiangxi, China

Received:2017-05-09 Revised:2017-06-12 Online:2017-12-26 Published:2018-01-02

摘要/Abstract

摘要：

目的:探讨氨曲南联用阿奇霉素对铜绿假单胞菌ATCC 27853及临床分离的15株铜绿假单胞菌的体外作用效果。方法: 分别采用肉汤稀释法、棋盘法测定氨曲南、阿奇霉素单用及两者联用对铜绿假单胞菌ATCC 27853、临床分离的15株铜绿假单胞菌的作用效果。刚果红平板实验鉴定临床分离的15株铜绿假单胞菌能否形成生物膜。结晶紫实验比较铜绿假单胞菌形成生物膜能力的强弱。连续稀释法绘制铜绿假单胞菌生物膜生长曲线及活菌计数。银染法观察氨曲南联用阿奇霉素对铜绿假单胞菌生物膜的情况。结果: 体外实验结果表明，氨曲南联用阿奇霉素，对铜绿假单胞菌ATCC 27853表现为协同作用；在临床分离的15株铜绿假单胞菌中，有6株表现为协同作用、有6株表现为相加作用、有3株表现为无关作用。刚果红平板实验表明，临床分离的15株铜绿假单胞菌中，有12株形成生物膜，3株未形成生物膜，成膜率为80%。结晶紫实验表明，编号16091217的菌株，与其他菌株相比，成膜能力最强。连续稀释法行活菌计数实验表明，阿奇霉素组、氨曲南组活菌数量与阿奇霉素+氨曲南组相比，有统计学差异。结论:氨曲南联用阿奇霉素对铜绿假单胞菌的体外作用以协同和相加作用为主，对能形成生物膜的铜绿假单胞菌，有协同杀菌作用。

关键词: 氨曲南, 阿奇霉素, 铜绿假单胞菌, 生物膜

Abstract:

AIM: To investigate the effect and mechanism of Aztreonam combined Azithromycin on Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, and clinical separation of 15 strains of Pseudomonas aeruginosain vitro. METHODS: Broth dilution method and checkerboard dilution method were used to determine Aztreonam alone or in combination with Azithromycin on Pseudomonas aeruginosa ATCC27853 and 15 clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa. Then, the biofilm formation of the clinical separation of 15 strains of Pseudomonas aeruginosa was identified by Congo red plate method. The crystal violet experiment was used to compare the ability of biofilm formation of Pseudomonas aeruginosa. Growth curve and viable count of Pseudomonas aeruginosa biofilm were investigated by continuous dilution method. The silver staining method was used to observe the biofilm of Pseudomonas aeruginosa by Aztreonam alone and in combination with Azithromycin. RESULTS: Azithromycin combined with Azithromycin on Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 showed synergistic effect; of the 15 isolates of Pseudomonas aeruginosa, 6 were synergistic, 6 additive, and 3 irrelevant. Congo red plate experiments show that the clinical separation of 15 strains of Pseudomonas aeruginosa, 12 strains can formed biofilm, 3 did not formed biofilm, and the rate of biofilm formation was 80%. The results of crystal violet experiment showed that the biofilm formation ability of 16091217 was the strongest when compared with other strains. The continuous dilution method of viable bacteria count experiment showed that the number of viable bacteria in Azithromycin group, Aztreonam group was significantly different compared with Azithromycin+Aztreonam group. The silver staining method showed that the inhibition effect of Azithromycin on the formation, early and mature stages of biofilm formation.CONCLUSION:The study found that the effect of Aztreonam combined with Azithromycin was mainly synergistic and additive in vitro. Aztreonam combined with Azithromycin presents synergistic bactericidal effect on Pseudomonas aeruginosa biofilm formation.

Key words: aztreonam, azithromycin, Pseudomonas aeruginosa, biofilm

中图分类号:

R952

李娜，刘桢宇，胡文，陈春林. 氨曲南联用阿奇霉素对产膜铜绿假单胞菌作用的实验研究[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2017, 22(12): 1400-1405.

LI Na, LIU Zhenyu, HU Wen, CHEN Chunlin. Effects of Aztreonam combined Azithromycin on Pseudomonas aeruginosa bioflim[J]. Chinese Journal of Clinical Pharmacology and Therapeutics, 2017, 22(12): 1400-1405.

参考文献

［1］周至品, 杨兴秀, 叶晓雪. 传统药物对铜绿假单胞菌生物被膜作用研究进展［J］. 中药药理与临床, 2015,31(6): 230-235.
［2］唐佩, 刘敏, 林允照，等. 铜绿假单胞菌生物膜形成调控机制的研究进展［J］.浙江预防医学, 2015,27(1): 48-51, 54.
［3］Xavier M. Azithromycin in Pseudomonas aeruginosa biofilms:bactericidal activity and selection of nfxB mutants［J］.Antimicro Agent Chemother, 2009,53(4):1552-1560.
［4］钱小英, 吴厉锋, 徐滨. 阿奇霉素对慢性阻塞性肺疾病急性加重患者的免疫调节作用研究［J］. 中国临床药理学与治疗学, 2013,18(11): 1288-1291.
［5］张晓云. 阿奇霉素抗菌机理及临床罕见不良反应［J］. 中国误诊学杂志, 2006, 6(24): 4910-4911.
［6］张晓华, 李亚芳. 阿奇霉素的临床应用进展［J］. 中国药业, 2006,15(3): 69-71.
［7］牛卉, 梁蓓蓓, 张雪，等. 多黏菌素E联合比阿培南对耐碳青霉烯铜绿假单胞菌的体外抗菌活性研究［J］. 中国临床药理学杂志,2015, 31(24): 2437-2439.
［8］钱学深, 夏文颖, 梅亚宁, 等.磷霉素联合亚胺培南对碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌的体外抗菌活性研究［J］. 中国临床药理学杂志, 2016, 32(2): 156-158.
［9］张建华, 张卫, 陈跃龙,等. 双J管生物膜相关感染临床特点及药敏实验分析［J］. 世界最新医学信息文摘:连续型电子期刊, 2015,15(37):1-2.
［10］Kirov SM, Webb JS, O'may CY, et al. Biofilm differentiation and dispersal in mucoid Pseudomonas aeruginosa isolates from patients with cystic fibrosis［J］. Microbiology, 2007,153(Pt 10): 3264-3274.
［11］欧倩怡, 何召云, 夏培元，等. 亚抑菌浓度头孢他啶对临床尿管分离大肠埃希菌生物膜的作用［J］. 第三军医大学学报, 2015, 37(2):111-115.
［12］Passariello C, Berlutti F, Selan L, et al. A rapid staining procedure to demonstrate glycocalyx production and bacterial biofilms［J］. New Microbiol, 1994, 17(3): 225-230.
［13］Wagner VE, Iglewski BH. P. aeruginosa Biofilms in CF Infection［J］. Clin Rev Allergy Immunol, 2008, 35(3): 124-134.
［14］高巧营, 吴尚为. 黏液型铜绿假单胞菌生物膜形成的研究进展［J］. 中国感染控制杂志,2011, 10(2): 158-160.

[1]	张文喜，刘东红，赵蓓，赵佳佳，蔡俏，高未，蔡奔奔. 阿奇霉素联合甲强龙治疗支原体肺炎肺实变患儿的随机对照临床试验[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2018, 23(9): 1052-1055.
[2]	罗玲玲，滕承志，李晓笑，潘丹峰. 阿奇霉素联合盐酸氨溴索治疗小儿支原体肺炎合并急性支气管炎的临床研究[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2017, 22(11): 1278-1282.
[3]	熊延靖, 董群. 大蒜素对体外白色念珠菌生物活性影响的研究[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2015, 20(11): 1233-1238.
[4]	郑美梅, 王方剑, 岳铁刚, 董丽妍, 段成城. 阿奇霉素对支气管哮喘患者肺功能及血清结缔组织生长因子的影响[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2013, 18(2): 194-197.
[5]	钱小英, 吴厉锋, 徐滨. 阿奇霉素对慢性阻塞性肺疾病急性加重患者的免疫调节作用研究[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2013, 18(11): 1288-1290.
[6]	孙璐, 胡艳玲, 杨亚楠, 包凯. 液相色谱-电喷雾离子阱质谱法研究人尿中阿奇霉素的主要代谢产物[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2009, 14(9): 984-989.
[7]	王进, 王喆, 刘健, 刘远程, 肖永红. 碳青霉烯类药物对铜绿假单胞菌体外抗菌行为比较[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2009, 14(12): 1356-1360.
[8]	蔡芸, 倪淑欣, 梁蓓蓓, 安毛毛, 王睿. 铁离子在铜绿假单胞菌生物被膜形成中的作用[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2007, 12(8): 861-864.
[9]	顾晓花, 沈策. 低浓度红霉素对铜绿假单胞菌抗吞噬能力的影响[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2006, 11(12): 1360-1363.
[10]	李东, 王晓玲, 孙业红. 口服阿奇霉素、米诺环素、氟罗沙星治疗男性非淋菌性尿道炎的成本-效果分析[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2003, 8(6): 692-695.
[11]	金玲湘, 颜雪琴, 翁海霞. 小剂量阿奇霉素长期使用治疗慢性呼吸道感染疾病的安全性探讨[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2003, 8(2): 213-214.
[12]	李秀, 张颖, 张素萍, 孟雷. 阿奇霉素与头孢唑啉治疗呼吸道感染的临床对照研究[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2000, 5(2): 154-156.