摘要： 目的: 探讨碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌（Carbapenem-resistant Klebsiella pneumonia, CRKP）耐药机制及临床分离株与呼吸机分离株之间的遗传相关性。方法: 收集41株碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌，其中28株为临床分离株，13株为呼吸机分离株。改良Hodge试验检测碳青霉烯酶，亚胺培南/EDTA结合（DDTs）及协同（DDST）试验检测金属酶，双纸片增效试验检测超广谱β-内酰胺酶（ESBLs），纸片扩散法检测药敏试验，E-test检测肺炎克雷伯菌对替加环素的MIC。PCR检测耐药基因，产物测序，确定其基因型。采用多位点序列分型（MLST）对CRKP进行分子遗传学分析。 结果: 所有菌株改良Hodge试验均阳性，基因检测均为blaKPC-2；只检测到一株菌产金属酶，基因型为blaNDM-1；未检测出blaGES、blaVIM、blaSPM、blaIMP及blaOXA等其它碳青霉烯酶基因。ESBLs检出率为 43.90%，但所有菌株均携带β-内酰胺酶基因，以blaCTX-M-24为主（92.68%, 38/41），其次为blaSHV-12（78.05%, 32/41）。38株携带blaTEM中，其中35株为广谱blaTEM-1，只有3株为超广谱blaTEM-104。所有菌株均检测出外膜蛋白ompk35基因，95.12%的菌株有外膜蛋白ompk36基因。28株临床分离株大部分来自ICU病房（67.86%, 19/28），其中有24例感染患者使用了呼吸机；41株CRKP对临床常用的18种抗菌药物中100%耐药的有9种，耐药率最低的为四环素类，分别为替加环素（2.44%, 1/41），米诺环素（7.32%, 3/41）和四环素（14.63%，6/41）。MLST结果显示，所有呼吸机分离株均属ST11型，28株临床分离株有25株也属ST11型，2个新的ST型已被Pasteur MLST数据库确认收录并分别命名为ST1854和ST1855。结论: CRKP多重耐药情况非常严重，携带blaKPC-2基因是其碳青霉烯类抗生素耐药的主要原因，存在ST11型肺炎克雷伯菌播散，且与呼吸机传播有关。