建立 DBT细胞模型比较药物对 MHV-A59 病毒的抗毒作用

中国临床药理学与治疗学 ›› 2005, Vol. 10 ›› Issue (11): 1253-1256.

建立 DBT细胞模型比较药物对 MHV-A59 病毒的抗毒作用

付红焱, 徐波, 王宏军¹, 宫泽辉

军事医学科学院毒物药物研究所新药评价研究室,北京 100850;
¹沈阳绿洲制药有限公司,沈阳 110016,辽宁

收稿日期:2005-08-17 修回日期:2005-09-27 出版日期:2005-11-26 发布日期:2020-11-12
作者简介:付红焱,女,博士后,讲师,研究方向:免疫药理。Tel:(0)13641013643 E-mail:fhy203964@sina.com
基金资助:
军事医学科学院青年科研基金资助(No2004D0102)

Comparison of drugs effect on MHV-A59 virus by established DBT cell model

FU Hong-yan, Xu Bo, WANG Hong-jun¹, GONG Ze-hui

Institute of Pharmacology and Toxicology,the Academy of Military Medical Sciences,Beijing 100850,China;
¹Shenyang OasisPharmaceutical Manufacturing CO,LTD,Shenyang 110016,Liaoning,China

Received:2005-08-17 Revised:2005-09-27 Online:2005-11-26 Published:2020-11-12

摘要/Abstract

摘要： 目的: 利用病毒学方法建立对小鼠肝炎病毒(MHV-A59)易感的星形胶质瘤细胞(DBT)模型,在细胞水平上建立抗冠状病毒药物的筛选的实验方法。方法: 通过测定细胞病变效应(CPE)的半定量法及噬斑定量法测定组织培养感染量(TCID₅₀);以PEG沉淀法部分纯化病毒,利用免疫学方法免疫动物制备抗MHV-A59的多克隆抗体;以血清学方法进行中和实验及酶联免疫方法定量测定病毒抗体的滴度及特异性;以100倍的TCID₅₀病毒量感染细胞同时加不同稀释度的药物,在同一条件下,动态观察不同时间的细胞的CPE变化。以能保护CPE<50%为阳性。并比较药物的最低抗毒浓度。结果: 制备的抗体对MHV病毒具有特异性的翻转作用;合成新药Cinanserin和Pkumdl-cvs-1003对MHV所致的细胞感染具有不同程度的保护作用。结论: 建立的MHV-A59敏感的DBT细胞模型可以用于抗冠状病毒药物的筛选。

关键词: 肝炎病毒, 星形胶质瘤细胞, 组织培养感染量, 酶联免疫, 抗体

Abstract: AIM: To establish sensitive DBT cell model to MHV-A59 by virology method,and develoPse-lective method of anti virus drugs in cell level.METHODS: Test 50% percent tissue culture infective dose(TCID₅₀)by cytopathetic effect(CPE)and plaque meth-ods.Preparation of antibody against virus by partially pu-rified virus immunized animal.Selective anti virus drug adding 100 fold of TICD50virus dose infected DBT cell as positive results by protesting lower50%CPE,and tested drugs lowest virus inhibit concentration.RESULTS: Pre-pared antibody has specificity reverse virus action,and new synthesized drugs had various degree protective ac-tions to virus infective.CONCLUSION: The DBT cell model sensitive to MHV-A59 can select anti coronaviruses drug.

Key words: MHV-A59, DBT cell, TCID50, ELISA, antibody

中图分类号:

R373.2

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