HPLC-MS-MS法测定人血浆中芬太尼浓度及其生物等效性研究

中国临床药理学与治疗学 ›› 2012, Vol. 17 ›› Issue (7): 785-790.

HPLC-MS-MS法测定人血浆中芬太尼浓度及其生物等效性研究

田莹莹¹, 王医成¹, 武惠斌², 邓晓兰¹, 谭志荣¹, 周宏灏¹, 欧阳冬生¹

¹中南大学临床药理研究所,长沙 410078,湖南;
²河南羚锐制药股份有限公司,信阳465550,河南

收稿日期:2012-01-10 修回日期:2012-02-28 发布日期:2012-07-17
通讯作者: 谭志荣,男,副研究员,研究方向:遗传药代动力学和药物分析。Tel: 0731-84805380 E-mail: tanzr@163.com
作者简介:田莹莹,女,在读硕士,研究方向:遗传药代动力学。Tel: 15874291441 E-mail: kehuanying@163.com

Determination of fentanyl in human plasma by HPLC-MS-MS and study on its bioequivalence

TIAN Ying-ying¹,WANG Yi-cheng¹,WU Hui-bin²,DENG Xiao-lan¹, TAN Zhi-rong¹,ZHOU Hong-hao¹, OUYANG Dong-sheng¹

¹Institute of Clinical Pharmacology,Central South University,Changsha 410078,Hunan,China;
²Lingrui Pharmaceutical Co.Ltd,Xinyang 465550,Henan,China

Received:2012-01-10 Revised:2012-02-28 Published:2012-07-17

摘要/Abstract

摘要： 目的: 建立液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS-MS) 测定人血浆中芬太尼的浓度。 方法: 以D5-芬太尼为内标,采用正己烷处理血浆样品。色谱柱为Thermo Hypurity C₁₈(150 mm×2.1 mm, 5 μm),流动相为甲醇∶水(含 0.1%甲酸)=(85∶15,V/V),流速为 0.3 mL/min,柱温 40 ℃;质谱条件为电喷雾电离源(ESI),检测方式为正离子方式、多离子反应监测(MRM),用于定量分析的离子为芬太尼m/z 337.1→188.1,D5-芬太尼m/z 341.9→187.9。 结果: 芬太尼血药浓度在 19.53～5000 pg/mL 范围内线性关系良好,定量下限为 19.53 pg/mL,日内和日间变异均小于 5.16%,提取回收率均在90％以上;应用此方法研究了24名健康男性受试者使用两种芬太尼透皮贴剂的药代动力学特点,受试制剂对参比制剂的相对生物利用度为(94.0±19.5)%。 结论: 本法具有快速、简便、灵敏、准确等特点,适合人血浆中芬太尼浓度测定。两种制剂生物等效。

关键词: 芬太尼, 液相色谱-质谱联用, 生物等效性

Abstract: AIM: To establish an HPLC-MS/MS assay to determine fentanyl in human plasma. METHODS: D-fentanyl was used as an interal standard. Human plasma samples were extracted by n-hexane.The separation was carried out on an Thermo Hypurity C₁₈ (150 mm×2.1 mm, 5 μm) column at 40 ℃.The mobile phase consisted of methanol-0.1% formic acid (85∶15, V/V) at a flow rate of 0.3 mL/min. Electrospray ionization (ESI) source was applied and operated in the positive ion mode. Quantitaion was performed using multiple reaction monitoring (MRM) of the m/z 337.1→188.1 for fentanyl , and m/z 341.9→187.9 for D-fentanyl. RESULTS: The liner calibration curves were obtained in the range of 19.53-5000 pg/mL for fentanyl.The lower limit of quantification was 19.53 pg/mL.The relative standard deviation of the intra-assay and inter-assay precision of variation was less than 5.16%.The extraction recovery for fentanyl was above 90%.To study the pharmacokinetics of two transdermal patches of fentanyl, preparations were given to 24 healthy volunteers, and the relative bioavailability of AUC_0-144 was (94.0±19.5)%. CONCLUSION: It is an accurate, sensitive and rapid method that can be applied to determine fentanyl in human plasma.Two preparations of fentanyl are bioequivalent.

Key words: Fentanyl, HPLC-MS/MS, Bioequivalence

中图分类号:

R969.1

田莹莹, 王医成, 武惠斌, 邓晓兰, 谭志荣, 周宏灏, 欧阳冬生. HPLC-MS-MS法测定人血浆中芬太尼浓度及其生物等效性研究[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2012, 17(7): 785-790.

TIAN Ying-ying,WANG Yi-cheng,WU Hui-bin,DENG Xiao-lan, TAN Zhi-rong,ZHOU Hong-hao, OUYANG Dong-sheng. Determination of fentanyl in human plasma by HPLC-MS-MS and study on its bioequivalence[J]. Chinese Journal of Clinical Pharmacology and Therapeutics, 2012, 17(7): 785-790.

参考文献

[1] 樊艳丽,尹珊珊,朱珠.芬太尼透皮吸收剂的安全性及合理使用[J].药物不良反应杂志,2007,9(1):28-32.
[2] 李正翔,赵晴,董伟林.高效液相色谱法测定人血浆中芬太尼浓度[J].中国医院药学杂志,2004,24(10):607.
[3] 张虹,方昱,李英.高效液相色谱法测定人血浆中芬太尼浓度[J].同济大学学报,2005,1(26) :49.
[4] 伦新强,梁健成.高效液相色谱法测定芬太尼的血药浓度[J].中国医院用药评价与分析,2010,10(9):820-821.
[5] 向荣凤,陈勇川,杨波,等.HPLC-MS/MS法测定大鼠血浆中芬太尼浓度及其代谢机制研究[J].中国药房,2010,21(37):3488-3490.
[6] Verplaetse R, Tytgat J. Development and validation of a sensitive ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrometry method for the analysis of fentanyl and its major metabolite norfentanyl in urine and whole blood in forensic context[J]. J Chromatogr B, 2010,878 (22):1987-1996.
[7] Takashina Y, Naito T, Mino Y, et al. Validated LC coupled to ESI-MS -MS analysis for fentanyl in human plasma and UV analysis in applied reservoir transdermal patches using a simple and rapid procedure[J]. J Clin Pharm Ther, 2009, 34 (5): 523-529.
[8] Coopman V, Cordonnier J, Pien K, et al. LC-MS/MS analysis of fentanyl and norfentanyl in a fatality due to application of multiple Durogesic transdermal therapeutic systems[J]. Forensic Sci Int, 2007,169 (2/3) :223-227.
[9] Huynh NH, Tyrefors N, Ekman L, et al. Determination of fentanyl in human plasma and fentanyl and norfentanyl in human urine using LC-MS/MS[J]. J Pharm Biomed Anal, 2005,37 (5):1095-1100.
[10] Lu C, Jia JY, Gui YZ, et al. Development of a liquid chromatography-isotope dilution mass spectrometry method for quantification of fentanyl in human plasma[J]. Biomed Chromatogr, 2010, 24 (7): 711-716.
[11] Yuan R, Zhang X, Deng Q, et al. Impact of CYP3A4*1G polymorphism on metabolism of fentanyl in Chinese patients undergoing lower abdominal surgery[J]. Clin Chim Acta, 2011, 412(9/10):755-760
[12] McClain DA, Hug CC Jr. Intravenous fentanyl kinetics[J]. Clin Pharmacol Ther, 1980, 28(1): 106-114.

[1]	燕强勇, 向大雄, 朱荣华, 杨玲凤, 阳喜定, 李晶晶, 范晓, 刘赛, 熊守军, 方平飞. 盐酸西那卡塞片在中国健康人群的生物等效性研究[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2023, 28(2): 171-177.
[2]	李雪静, 江金平, 李思凝, 万林飞, 周响响, 杨梿, 兰轲. 一项在中国精神分裂症受试者中评估氯氮平片的生物等效性研究[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2023, 28(10): 1121-1130.
[3]	刘敏, 孔祥, 章叶, 顾逸飞, 项雪梅, 黄凯. 经口吸入制剂在中国健康受试者生物等效性试验中的安全性分析[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2023, 28(10): 1131-1138.
[4]	顾逸飞, 储楠楠, 黄凯, 阙琳玲, 张继胜, 项雪梅, 贺晴. 药效动力学研究在经口吸入制剂生物等效性评价中的应用进展[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2022, 27(7): 822-833.
[5]	吴娟, 王志强, 周仁鹏, 杨晶晶, 秦慧玲, 张茜, 鲁超, 胡伟. 甲苯磺酸索拉非尼片在中国健康受试者的生物等效性研究[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2022, 27(3): 281-286.
[6]	李佳佳, 陈蒙蒙, 王睿娴, 黄梦朦, 李军, 上官王宁. 阿芬太尼对扁桃体腺样体切除患儿气管插管效果的随机双盲研究[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2022, 27(2): 184-189.
[7]	史革鑫, 崇锐, 贺坤, 吴海棠, 周宇, 顿中军, 温清, 张继国, 张荣. 吗替麦考酚酯胶囊在中国健康男性受试者空腹及餐后状态下的完全重复交叉设计的生物等效性研究[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2022, 27(11): 1255-1263.
[8]	章钰, 黄超群, 白玥, 励建琳, 周盈丰, 袁开明, 李军. 术前单剂量芬太尼对小儿日间扁桃体腺样体切除术后镇静和苏醒期躁动的影响[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2022, 27(11): 1272-1277.
[9]	伍小霞, 周虎. 瑞芬太尼在重型颅脑外伤患者术后ICU镇静镇痛中的应用[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2022, 27(10): 1119-1124.
[10]	胡殷, 杨丹丹, 徐毅超, 邵蓉, 阮邹荣, 江波, 陈金亮, 楼洪刚. 人工神经网络模型在坎地沙坦酯片生物等效性研究中的应用[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2022, 27(1): 63-69.
[11]	蔡名敏, 邵静, 唐璐, 孙秋月, 窦婷, 钱薇, 王慧萍. 丁苯酞注射液在中国健康人体内的生物等效性研究[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2022, 27(1): 70-76.
[12]	王金伙, 郭建荣. 阿芬太尼的临床药理特性及其麻醉应用进展[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2021, 26(7): 824-829.
[13]	郑斌婕, 刘娜, 曾祥昌, 黄馨仪, 陈露露, 欧阳冬生. 肠道菌群对药物代谢动力学的影响及其在仿制药质量与疗效一致性评价中的思考[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2021, 26(6): 662-671.
[14]	孙宇宸, 刘银辉, 张贤, 袁通, 荆梦瑶, 张新宇, 杨劲. 人体生物等效性临床试验中健康受试者筛选标准探讨[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2021, 26(6): 714-720.
[15]	徐国防, 张思森, 刘平, 梅家转, 刘玮玮, 刘亚欧, 齐琦. 卡培他滨在中国乳腺癌患者中的群体药代动力学研究[J]. 中国临床药理学与治疗学, 2021, 26(5): 552-559.