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中国临床药理学与治疗学 ›› 2016, Vol. 21 ›› Issue (2): 139-144.

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miR-200a对肾小管上皮细胞转分化的调控作用

龚 艺,周宝尚,陈 华,张 璟   

  1. 第三军医大学新桥医院肾内科,重庆 400037
  • 收稿日期:2015-09-24 修回日期:2015-11-19 出版日期:2016-02-26 发布日期:2016-03-01

  • Received:2015-09-24 Revised:2015-11-19 Online:2016-02-26 Published:2016-03-01

摘要:

目的: 探讨miR-200a对TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞间质转分化的影响。 方法: 体外培养肾小管上皮细胞(HK-2),TGF-β1(终浓度为10 ng/mL)作用12、24、48 h,采用qPCR检测miR-200a的表达,qPCR和Western Blot检测上皮转分化相关蛋白E-cadherin和ɑ-SMA的mRNA和蛋白表达;用agomir和antagomir分别转染细胞,其中转染agomir后用TGF-β1诱导肾小管上皮细胞,qPCR、Western Blot和细胞免疫荧光检测E-cadherin和ɑ-SMA的mRNA和蛋白表达情况。 结果: 在TGF-β1诱导下miR-200a的表达随着时间逐渐降低(P<0.05),E-cadherin表达呈降低趋势(P<0.05),ɑ-SMA表达逐步上调(P<0.05);agomir使miR-200a表达明显升高(P<0.05),antagomir使miR-200a表达降低(P<0.05);与转染NC-miRNA相比,agomir在mRNA和蛋白水平上调E-cadherin的表达(P<0.05),下调ɑ-SMA的表达(P<0.05);antagomir则抑制E-cadherin的表达(P<0.05),增加ɑ-SMA的表达(P<0.05),细胞免疫荧光表达情况与蛋白水平相符。 结论: miR-200a能减弱TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞转分化。

关键词: miR-200a, 上皮间质转分化, 转化生长因子β1