中国临床药理学与治疗学 ›› 2016, Vol. 21 ›› Issue (5): 490-494.
范芳华，吴国友，周筱琼，肖 震，程璐
摘要：
目的: 本研究采用RNA干扰技术和合成小分子抑制剂的方法，研究siHybrids分子对产碳青霉烯酶肺炎克雷伯杆菌耐药性的影响。方法: 通过对临床分离的48株肺炎克雷伯杆菌进行药敏实验，初步筛选并收集了耐碳青霉烯类抗生素的菌株；进一步利用PCR检测，筛选出携带碳青霉烯酶基因kpc-2的耐药株。利用siHybrids技术，针对kpc-2设计合成siHybrids 杂合分子，对肺炎克雷伯菌碳青霉烯酶基因kpc-2进行特异性沉默后，通过荧光定量PCR实验检测siHybrids沉默靶基因kpc-2的体外表达水平，并通过联合抑菌实验验证siHybrids分子提高抗生素抗菌活性乃至逆转细菌耐药性的效果。结果: 合成的小分子siHybrids可以使耐药肺炎克雷伯杆菌kpc-2基因的表达下调，并且与碳青霉烯类抗生素亚胺培南、美罗培南、厄他培南分别联合使用，可使肺炎克雷伯杆菌对亚胺培南、美罗培南、厄他培南由耐药转为敏感。结论: siHybrids可以特异地抑制耐药肺炎克雷伯杆菌kpc-2基因的表达，通过干扰产碳青霉烯酶基因kpc-2造成肺炎克雷伯杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药性的逆转。
