中国临床药理学与治疗学 ›› 2015, Vol. 20 ›› Issue (7): 763-768.
刘晓颖1,蔡诗婷1,杨敏1,萧定璋1,谭红红1,陈景1,陈少贤1,陈红梅2,杨慧1,余细勇1
摘要: 目的: 建立棕榈酸(palmitate acid, PA)诱导体外培养心肌细胞胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)及凋亡模型,检测Toll样受体2(TLR2)和NLRC5在此模型中的表达变化及研究相关的可能机制。 方法: 用500 μmol/L 终浓度的PA处理培养H9C2心肌细胞后采用Annexin Ⅴ/PI双染和流式细胞术分析细胞凋亡情况,并分别采用q-PCR及Western blot方法分析处理后细胞的胰岛素受体(InsR)、CD36、PGC-1α、TLR2、NLRC5、SIRT1、p-AMPK/AMPK的mRNA或蛋白表达变化。结果: 与对照组比较, PA处理24 h后H9C2细胞的早、晚期和总凋亡率显著升高, 分别为(7.55±3.80)%、(53.84±4.70)%和(61.39±8.54)% (P<0.05); 处理6 h后心肌细胞的PGC-1α mRNA相对表达量开始下降(P<0.05),TLR2和NLRC5则显著升高(P<0.01),CD36 mRNA相对表达量在PA处理14 h时升高(P<0.05);InsR、SIRT1和AMPK蛋白相对表达量从PA处理8 h时开始下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。 结论: TLR2/NLRC5参与PA诱导的心肌细胞IR和凋亡,并且可能与AMPK/SIRT1/PGC-1α信号通路的活性下降有关。