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中国临床药理学与治疗学 ›› 2016, Vol. 21 ›› Issue (7): 745-748.

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体外沉默血管内皮生长因子对D-(-)-MTX/A549耐药细胞株迁移侵袭能力的影响

陶绍能1,王莹莹1,戴云海1,程光华1,吕 坤2   

  1. 1皖南医学院弋矶山医院核医学科; 2中心实验室,芜湖 241000,安徽
  • 收稿日期:2016-05-11 修回日期:2016-06-07 出版日期:2016-07-26 发布日期:2016-08-05

  • Received:2016-05-11 Revised:2016-06-07 Online:2016-07-26 Published:2016-08-05

摘要:

目的: 研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)基因沉默对D-(-)-MTX /A549耐药细胞株迁移和侵袭的影响及可能的分子机制。方法: 采用siRNA技术沉默D-(-)-MTX/A549耐药细胞株VEGF基因, 细胞划痕试验和Transwell试验检测细胞迁移和侵袭能力,实时荧光定量PCR检测VEGF、MMP-2 mRNA,Western blot检测p-ERK1/2蛋白的表达。结果: VEGF siRNA序列及阴性对照成功转染至D-(-)-MTX/A549后,VEGF mRNA表达水平明显下降, 与阴性对照相比下降了2.29倍,差异具有统计学意义(P=0.002),表明转染成功。阴性对照组与空白组差异无统计学意义(P>0.05)。转染后,D-(-)-MTX/A549迁移和侵袭能力明显下降(P值均<0.05),D-(-)-MTX/A549耐药细胞 MMP-2 mRNA、p-ERK1/2的蛋白达也较阴性对照水平明显下降(P值均<0.05)。结论: 抑制VEGF基因表达可以抑制D-(-)-MTX/A549细胞的迁移和侵袭能力,这一过程可能涉及到MMP-2和p-ERK1/2信号通路。

关键词: 血管内皮生长因子, 甲氨蝶呤, 耐药, 细胞迁移, 细胞侵袭