目的: 观察银杏素对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞铁死亡的影响,并探讨其通过调控GPX4/OTUB1轴发挥抗肿瘤作用的机制。方法: 将MDA-MB-231和MDA-MB-468细胞分为溶媒对照组(0.1% DMSO)、银杏素组(5、10、20 μmol/L)和联合干预组(20 μmol/L银杏素+10 μmol/L Fer-1或20 μmol/L DFP)。采用CCK-8法检测细胞活力;EdU染色观察细胞增殖;集落形成实验评估细胞增殖能力;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭;流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)、脂质过氧化和Fe2+水平;透射电镜(TEM)观察线粒体形态;Western blot检测GPX4、OTUB1等蛋白表达;免疫共沉淀分析GPX4与OTUB1的相互作用;免疫荧光观察GPX4和OTUB1的共定位。结果: CCK-8、EdU染色实验、集落形成实验和Transwell实验表明,银杏素处理可引起MDA-MB-231和MDA-MB-468细胞的增殖侵袭迁移能力显著降低,且呈剂量依赖性。铁死亡相关指标检测显示,银杏素处理组细胞内ROS水平、脂质过氧化产物和Fe2+含量显著升高(P<0.01),GSH水平显著降低(P<0.01),而铁死亡抑制剂Fer-1和DFP可部分逆转这些效应。铁死亡抑制剂对侵袭迁移的恢复效果也得到了证实。TEM观察到银杏素诱导的典型铁死亡线粒体形态改变。Western blot显示银杏素显著下调GPX4蛋白表达(P<0.01),促进其泛素化降解。免疫共沉淀证实银杏素抑制OTUB1与GPX4的相互作用(P<0.01)。结论: 银杏素可通过抑制OTUB1与GPX4的相互作用,促进GPX4泛素化降解,进而诱导铁死亡,发挥抗TNBC作用。